一、导言
近日，圣庭医疗与台州学院附属台州中心医院、台州学院医学院肿瘤研究所、台州学院附属台州市医院、台州学院医学院药理学系的联合研究发现，杀伤细胞免疫球蛋白样受体2DL4（KIR2DL4）的敲低或过度表达可以分别抑制或促进肾细胞癌（RCC）增殖。研究成果在中科院二区期刊《LIFE SCIENCES 》IF=6.780上发表，该研究结果有望为寻找潜在的RCC抗癌药物提供理论基础。
二、研究内容
本研究纳入了TCGA数据库531例RCC的患者，使用了生物信息学分析、免疫组织化学、免疫印迹等技术对KIR2DL4是否由RCC表达及其在RCC进展中的可能作用进行了研究。
三、研究结果
NO.1 KIR2DL4在RCC中过量表达
在本研究中，利用GEPIA在线分析工具进一步分析了不同等级RCC的KIR2DL4 mRNA表达水平，我们发现KIR2DL4的mRNA表达随着RCC等级的增加而增加 (图1a) 。
图1 KIR2DL4在RCC细胞系中的蛋白表达情况。
GAPDH被用来作为内参。
NO.2 敲低KIR2DL4的表达会降低Caki-1和769-P细胞的细胞活力和细胞系形成
通过转染KIR2DL4-shRNA敲低KIR2DL4在Caki-1 和769-P细胞中的表达，并检查其对它们增殖表型的影响。结果如图2c和3c所示，KIR2DL4敲低可以明显降低约35% Caki-1和769-P细胞的活力。在细胞周期检测中，KIR2DL4敲低后约50%~70%的细胞 G1/G0停滞(图2d和3d) ，这表明KIR2DL4敲低抑制了Caki-1和769-P细胞的细胞系形成。
图2 KIR2DL4敲低可以减少Caki-1细胞的增殖。
图3 KIR2DL4敲低可以抑制769-P细胞的增殖，
KIR2DL4敲低对细胞周期分布的影响。
NO.3 KIR2DL4可影响肿瘤相关途径和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K) /AKT信号途径
免疫印迹检测显示，在KIR2DL4高表达的Caki-1和769-P细胞中，磷酸化的AKT水平被上调 (图4c) ，而在KIR2DL4敲低的Caki-1细胞中，磷酸化的AKT水平在KIR2DL4被敲低后下降 (图4d)，这些观察表明，KIR2DL4可能通过PI3K/AKT途径促进RCC的进展。
图4 通过免疫印迹分析KIR2DL4过表达或敲低后的AKT磷酸化水平，GAPDH用作内参。
四、小结与启发
在过去的十年中，一些靶向药物被美国食品和药物管理局 (FDA)批准用于RCC治疗，包括索拉非尼、舒尼替尼、替米罗莫司和Ever-olimus[1-3]。在这个时间框架内，RCC的中位总生存率有了明显的改善。此外，随着2015年FDA批准nivolumab用于晚期RCC患者，免疫疗法也在重新兴起[4-5]。总的来说，RCC的免疫疗法正在获得研究兴趣。
在本研究中，我们的研究结果表明KIR2DL4在RCC细胞中过度表达，而KIR2DL4的敲低或过度表达可以分别抑制或促进RCC细胞增殖。此外，过表达KIR2DL4的Caki-1和769-P细胞的pAKT水平更高，这表明KIR2DL4可能通过PI3K/AKT信号通路促进RCC的进展。基于该研究结果，有望为寻找潜在的RCC抗癌候选药物提供理论基础。
参考文献
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